Tato souprava využívá technologii izotermické amplifikace nukleové kyseliny, která funguje při pokojové teplotě a konstantním teplotním rozsahu (typicky 39 až 42 stupňů). Proces začíná reverzní transkriptázou syntetizující komplementární DNA (cDNA) z RNA templátů pomocí specifických primerů. Komplex tvořený rekombinázou a primery, za pomoci pomocných proteinů a jednořetězcových vazebných proteinů, hledá a váže se na cílovou homologní doménu. To vede k vytvoření oblasti D-smyčky na homologním místě, což iniciuje výměnu vlákna. Jakmile se rekombináza disociuje, polymeráza se váže na 3' konec primeru a iniciuje prodloužení řetězce. Souprava také využívá exonukleázovou aktivitu a specifické molekulární sondy pro{10}}monitorování amplifikačního procesu v reálném čase pomocí fluorescenčního detekčního zařízení.
【Vlastnosti】
Vysoká citlivost
Navrženo pro přesnou amplifikaci RNA, zajišťující přesnou detekci.
Rychle
Reakce je dokončena za pouhých 20 minut a nabízí rychlou amplifikaci.
Stabilní
Formát suchého prášku zjednodušuje manipulaci a skladování.
Široká kompatibilita
Kompatibilní s řadou fluorescenčních kvantitativních PCR přístrojů, fluorescenčních zesilovačů s konstantní teplotou a dalších zařízení pro detekci fluorescence.
【Návrh základního nátěru】
Pro optimální výkon by primery měly mít délku 30–35 bp. Kratší primery mohou ovlivnit rychlost a citlivost amplifikace. Primery jsou navrženy tak, aby se vyhnuly sekundárním strukturám, které mohou bránit procesu amplifikace. Doporučená délka amplikonu je mezi 150–500 bp.
【Konstrukce fluorescenční sondy】
Sekvence sondy se nepřekrývá se specifickým rozpoznávacím místem primeru, délka je 46-52 nt a sekvence se vyhýbá palindromické sekvenci, vnitřní sekundární struktuře a kontinuálním opakovaným bázím. V sondě jsou čtyři modifikační místa: dSpacer (tetrahydrofuran, THF) je označen uprostřed asi 30-35 nt od 5' konce jako rozpoznávací místo pro exonukleázu; fluorescenční skupina je označena upstream od místa THF, zhášecí skupina je označena downstream a vzdálenost mezi těmito dvěma skupinami je 2-4 nt; THF je asi 15 nt od 3' konce a 3' konec je značen blokující skupinou, jako je aminoskupina, fosfátová skupina nebo C3-spacer.
【Složení stavebnice】
|
Compozice |
Czáměr |
|
Vyrovnávací paměť |
1,6 ml × 1 zkumavka |
|
B pufr |
150 μL × 1 zkumavka |
|
Činidlo |
48T |
|
Návod k obsluze |
1 Kopírovat |
Poznámka:Vzhledem k problému degradace nukleových kyselin produkty řady RNA neposkytují pozitivní kontrolní templáty a primerové sondy.
【Specifikace balení】
- Specifikace: 48 T/balení
【Kto úložiště】
- Podmínky skladování: Skladujte při teplotě nižší nebo rovné -20ºC v prostředí s konstantní teplotou. Chraňte před světlem a vyhněte se silnému tlaku.
- Doba použitelnosti: 14 měsíců.
【Poznámka】
- Pro vývoj projektu MIRA je nutné přidat primery/sondy, které si sami{0}}navrhli.
- Sada je dostupná ve dvou typech - DNA a RNA. Typ RNA zahrnuje reverzní transkriptázu, která umožňuje amplifikaci s RNA, dsDNA a ssDNA jako templáty. Typ DNA se může amplifikovat pouze s dsDNA jako templátem.
- Dostupné ve třech typech - Basic, Fluorescent a Test Strip. Vyberte si vhodnou sadu podle svých potřeb a použijte odpovídající primery/sondy.
Populární Tagy: mira rna izotermická rychlá amplifikační sada fluorescence -ii, Čína mira rna izotermická rychlá amplifikační sada fluorescence -ii výrobci, dodavatelé
