MIRA DNA izotermální rychlá amplifikační souprava Fluorescence

Izotermální amplifikační souprava MiRA DNA využívá pokročilou technologii amplifikace nukleových kyselin jak při teplotě místnosti, tak při konstantní teplotě (obvykle 39 ° C až 42 ° C). S pomocí pomocných proteinů a jednořetězcových vázajících proteinů tvoří rekombináza a primery komplex, který hledá a váže se na cílovou homologickou doménu. To má za následek vytvoření oblasti D-smyčky na homologním místě a zahájí výměnu pramenů. Jak se rekombináza disocituje z komplexu, polymeráza se váže na 3 'konec primeru, začíná proces prodloužení řetězce. Navíc pomocí využití exonukleázové aktivity používá sada specifické molekulární sondy určené pro šablonu, což umožňuje sledování procesu zesílení cílového fragmentu v reálném čase prostřednictvím zařízení pro detekci fluorescence..

Pro optimální výkon by měl být primery 30-35 bp na délku. Krátké primery mohou snížit rychlost amplifikace a citlivost na detekci. Návrhy primerů by se měly vyhnout sekundárním strukturám, které by mohly bránit zesílení. Doporučená délka amplikonu je 150-300 bp.

Fluorescenční sonda by se neměla překrývat s konkrétním místem rozpoznávání primeru. Mělo by to být 46-52 nt na délku, vyhnout se palindromickým sekvencím, vnitřních sekundárních strukturách a kontinuálních opakovaných základech. Návrh sondy obsahuje čtyři modifikační místa:

• A dspacer(tetrahydrofuran, thf) při přibližně 30-35 nt z 5 'konce, působí jako rozpoznávací místo pro exonukleázu.
• A fluorescenční skupinaje označen proti proudu od webu THF.
• A zhášecí skupinaje umístěn po proudu, 2-4 nt od fluorescenční skupiny.
• 3 'konec sondy je označen aBlokovací skupina(např. Skupina aminu, fosfátová skupina nebo c 3- spacer), s THF přibližně 15 nt od 3 'konce.

• Specifikace: 48 T/Pack

Populární Tagy: Fluorescence miRA DNA izotermální rychlé amplifikační soupravy, Čína Mira DNA izotermální rychlé amplifikační soupravy Výrobci fluorescence, dodavatelé